细胞破碎技术是一种利用外力破坏细胞膜和
细胞壁的技术,目的是使细胞内容物包括目的产物成分得以释放。这种技术是分离纯化细胞内合成的非分泌型生化物质(产品)的基础。随着重组
脱氧核糖核酸技术和组织培养技术的发展,
蛋白质的大规模生产成为可能。
高压均质机内的物料在高压条件下进入可调节压力大小的阀组中,失压后的物料从可调节限流缝隙中以极高的流速(1000米/秒,最高可达1500米/秒)喷出,撞在阀组件之一的冲击环上,导致空穴爆炸,进而实现物料的强烈粉碎细化。
高速物料通过泵腔内通道和阀口狭缝时会产生剪切效应,最终使得物料均匀细化至0.03μm-2μm
粒径。
细菌的
细胞壁主要由
肽聚糖组成,这是一种难溶性的聚糖链,通过短肽交联形成网状结构,赋予细胞特定的形状和强度。细胞破碎的主要障碍在于肽聚糖的网状结构,其致密程度和强度取决于聚糖链上肽键的数量及其交联程度。
酵母细胞壁的最里层由
葡聚糖细纤维构成,形成刚性骨架,外部覆盖有一层糖蛋白,最外层则是
甘露聚糖。细胞破碎的难度主要取决于壁结构的交联紧密度和厚度。
真菌的细胞壁主要包括葡聚糖、
甲壳质和糖蛋白。最外层是葡聚糖
混合物,第二层是糖蛋白网状结构,第三层主要是
蛋白质,最内层是几丁质。
细胞壁的强度不仅与聚合物的网状结构相关,还因含有几丁质或
纤维素的纤维状结构而增强。
植物细胞壁分为初生壁和次生壁两部分。初生壁由纤维素
微纤丝和结构蛋白组成,形成纵横交错的网络结构。次生壁增加了纤维素和
半纤维素的含量,使得细胞壁更加坚硬。
高压匀浆器是常见的设备,由正向排代泵和排出阀组成,通过高压迫使
细胞浆液在排出阀的小孔中高速冲出,射向撞击环,从而破碎细胞。操作方式灵活,可单次或多次循环通过,也可连续操作。为控制温度上升,可通过干冰调节入口温度。
超声波破碎法利用超声波振荡器处理
细胞悬浮液,振荡器分为槽式和探头直接插入介质两种形式,后者破碎效果更好。
酶解法利用溶解
细胞壁的酶处理菌体细胞,再利用其他方法破坏细胞膜,以提高胞内产物的通透性。