限速酶（英语：rate-limiting enzyme）是指在生物化学反应通路中催化反应速率最慢的酶，在代谢过程中的一系列反应中，如果其中一个反应进行的很慢，便成为整个过程的速率控制步骤，催化此限速步骤的酶称为限速酶或者标兵酶。标兵酶是一种调节酶，它们常常也是别构酶。限速酶的概念具有相对性，它不单独指一种酶，而是指在特定代谢通路中起限速作用的酶。限速酶的特点是它们一般催化不可逆反应，因此在代谢过程中起到关键调控作用。

在糖酵解反应中，有三个限速酶：

在三羧酸循环中，有三个限速酶：

通过对这些关键酶的研究和调控，科学家可以更好地理解和控制代谢过程，这在疾病治疗和生物技术应用中具有重要意义。