核酸激酶是由T偶数噬菌体所感染的大肠杆菌分离出来的酶。

核苷酸激酶

本酶具有以下活性：

1.5'-OH末端寡聚核苷酸的磷酸化：5'-OH+NTP→5'-P+NDP

2.5'-P末端寡核苷酸的去磷酸化：5'-P+NDP→5'-OH+NTP(最适pH:6.2)

3.交换反应：5'-P+NTP+NDP5'-P+NDP+NTP

4.3'磷酸酶(Phosphatase)活性：

(Poly)核苷酸3'-P→(Poly)nucleotide3'-OH+Pi(最适pH:5.9)

※磷酸酶活性在肽链的C-末端附近，激酶活性在N-末端附近。

活性定义

以MicrococcalNuclease处理的小牛胸腺脱氧核糖核酸为底物，在37℃．pH7.6的条件下，30分钟内使1nmol的[g-32P]atp掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

纯度

10U的本酶和1mg的l-HindIII片段在37℃下反应24小时，DNA的电泳谱带不发生变化。

1U的本酶和1mg的16S,23SrRNA在37℃下反应24小时，RNA的电泳谱带不发生变化。

用途

DNA及核糖核酸5'末端的标记。

合成DNA接头(Linker)的5'末端磷酸化。

由T偶数噬菌体所感染的大肠杆菌分离出来的酶，能催化atp的γ-磷酸转移到脱氧核糖核酸或RNA的5′-OH末端生成ADP的反应。EC2．7．1．78。因为此酶的催化反应特异性很高，可用32P标记的ATP特异地标记多核苷酸的5′末端。广泛应用于多核苷酸的链长的测定和5′末端核苷酸排列的确定等核酸结构的研究。

核酸酸基扩增技术（SELEX)可从极大容量的随机寡聚核苷酸文库中筛选得到与靶分子高特异性和高亲和力结合的核酸配基。对寡核苷酸进行化学修饰，可以提高核酸配基的稳定性，增加其功能多样性及生物利用度。SELEX在基础研究、诊断和治疗试剂的研制及药物筛选等领域有广泛用途。

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