二苯胺试剂(鉴定DNA的试剂)

二苯胺试剂

鉴定DNA的试剂

在沸水浴的条件下，脱氧核糖核酸与二苯胺反应呈现蓝色。因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

配制

A液：1.5克二苯胺(C12H11N)溶于100ml乙酸(乙酸,乙烯O2)中，再加1.5ml浓硫酸，用褐色瓶保存（光下分解）。如冰醋酸呈结晶状态，则需加温后待其熔化，再使用。

B液：体积分数为0.2%的乙醛溶液(C2H4O)。

将0.1mlB液加入10mlA液中，制成二苯胺试剂，现配现用。

使用方法

1、配制二苯胺试剂取0.1mLB液，滴入到10mLA液中，混匀。

2、鉴定：取4mLDNA提取液放入试管中，加入4mL二苯胺试剂，混匀后观察溶液颜色（不变蓝）。

用沸水浴加热。在加热过程中，随时注意试管中溶液颜色的变化（逐渐出现浅蓝色）。

3、加热后冷却观察。

脱氧核糖核酸在酸性条件下加热，其嘌呤碱与脱氧核糖间的糖键断裂，生成嘌呤碱、脱氧核糖和脱氧核苷酸，而2-脱氧核糖在酸性环境中加热脱水生成ω-羟基-γ-酮基正戊醛，与二苯胺试剂反应生成蓝色物质。

参考资料

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配制

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