本发明涉及人工合成
脱氧核糖核酸的必备
前体原料的制备方法。本发明采用酶解—酶促—化学合成全新工艺。采用天然DNA经溶液态脱氧核糖核酸酶的酶解可得到DNMP，DNMP收率为70—90%。DNMP在经DNMP酶反应一步后结合化学反应，可分别转化为相应的DNTP，经层析法纯化，以
钠盐或
钡盐的形式沉淀分离，可以得到纯度为95%—97%的DNTP。本发明不仅使DNTP的生产工艺变的简单，而且使生产量达到了
摩尔级，适于工业生产，并且污染性极小。
权利要求书1．一种脱氧核糖核苷三磷酸的制备方法，包括以下步骤：（1）酶解：DNMP酶制备的培养基的基本组成和含量为5——10%的细菌培养用
酵母提取物、0．5—2%的
蛋白胨、4—6%的
磷酸氢二钾、2—5%的磷酸氢二钾、10—15%的葡萄糖、0.5—3%的
尿素、0.2%的氯化钙、0.2%的
氯化锌，余量为
水溶液；以上培养基经灭菌、接种、收集和萃取直接获得；萃取液不经纯化可直接使用；将商品
脱氧核糖核酸分散在水中制得DNA水溶液，在所述DNA溶液中加入锌离子使其浓度达到2×10—2—1×10—4M，根据脱氧核糖核酸酶的活性加入其量，酶解在30—55℃下进行；酶解5—15小时；（2）酶促：DNMP水溶液用10M的
氢氧化钾溶液调节PH为4—8，加入
磷酸盐，再加入金属离子，用ATP作催化剂，根据DNMP酶的活性加入DNMP酶，50—55℃保温48—96小时；（3）化学合成：酶促反应完成后，加入等量的醇类
溶剂，2—5倍量的磷酸或磷酸盐，20—40倍量的DCC，80—90℃下反应4—8小时；所得混合液为磷酸盐，DNMP、DNDP、DNTP和多磷化合物；该溶液经过层析分离可得到纯净的DNTP。