补体的测定包括测定补体总量、溶血性贫血活性、单个补体成份和补体片段量以及补体参与试验等。利用抗原抗体复合物同补体结合，把含有已知浓度的补体反应液中的补体消耗掉使浓度减低的现象，以检出抗原或抗体的试验，为高敏度检出方法之一，特别是根据抗原物质的特性，抗原抗体反应不能用沉淀反应或凝集反应观察时也可以利用此法。

试验由两个阶段组成：首先将经过56℃处理30分钟使补体灭活的抗血清，与抗原及补体（通常将豚鼠血清作适当稀释后使用）混合使起反应。第二是加入已同抗绵羊红细胞抗体相结合的绵羊红细胞（致敏红细胞）。在最初阶段对消耗补体建立起足够的抗原抗体反应时，没有发生致敏红细胞的溶血性贫血，但补体剩余下来则引起溶血反应。用于检查梅毒的梅毒补体结合反应（瓦氏反应，Wassermann reaction）是最常进行的补体结合试验。