牛血清白蛋白（BSA），又称第五组分，是牛血清中的一种球蛋白，包含583个氨基酸残基，分子量为66.430 kDa，等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用，例如在western blot中作为Blocking agent。

【词条中文名称】牛血清白蛋白

【中文同义词】蛋白粉；牛白蛋白；卵蛋白粉；血清蛋白；血清白蛋白；牛血蛋白质；复合氨基酸；牛血清蛋白；牛血清白蛋白；血清白蛋白（牛）

【词条拼音名称】Níuxuèqīng báidànbái

【词条英文名称】Bovine albumin

【词条英文别名】Bovine serum albumin

【词条英文同义词】nhsa;BSA-C;AC-BSA;ALBUMIN, PIG;albumenpowder;SERUM ALBUMIN;ACETYLATED BSA;BSA ACETYLATED;Bovine albumin;BSA, METHYLATED

【词条分类性质】名词词组，偏正词组

【词条适用范围】医学领域，药学领域

【CAS数字登录号】9048-46-8

BSA结构

化学性质

溶解度 : pbs: \u003e40 mg/mL

form : lyophilized powder

Merck : 13,8542

稳定性：稳定，不兼容氧化剂：强酸 储存条件 : 2-8°C

1、生化研究、遗传工程和医药研究

2、医药保健食品、调味品

3、维持渗透压、pH缓冲、载体作用

生产方法

以 牛血为原料分离出血清，用硫酸铵分级沉淀后，经辛酸处理精制而得。

贮存方法

每10g加100ml水进行溶解，或用 pbs溶解也可，视用途而决定。然后分装成小支。若不使用防腐剂可贮存在零下20或30摄氏度的恒温柜中，若使用防腐剂（如0.1%叠氮化钠）则可贮存在零上4摄氏度的环境下。一般可存放数月不变质。防腐剂可能对牛血清白蛋白的效果造成影响，应慎用。

成分结构

牛血清中的简单蛋白，是血液的主要成分（38g/100ml），分子量68kD。等电点4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。仅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成，其中35个半胱氨酸组成17个二硫键，在肽链的第34位有一自由基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。在动物细胞无血清培养中，添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。

BSA一般做为稳定剂被用于限制酶或者修饰酶的保存溶液和反应液中，因为有些酶在低浓度下不稳定或活性低。加入BSA后，它可能起到“保护”或“载体”作用，不少酶类添加 BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不会受到什么影响。对多数底物脱氧核糖核酸而言，BSA可以使酶切更完全，并可实现重复切割。在37℃，酶切反应超过1h时，BSA可以使酶更加稳定，因为在不含BSA的反应缓冲液中，许多限制性内切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的时间。而BSA可以结合缓冲液或底物DNA中抑制限制性内切酶活性的金属离子和其它化学物质。

1.BSA是酶的稳定剂，防止酶的分解和非特异性吸附；

2.BSA能减轻有些酶的变性，能减轻有些不利环境因素如加热，表面张力及化学因素引起的变性，至于作用机理还不明确，可能是因为它结构中有17个二硫键和一个巯基，巯基的化学反应很活泼，二硫键有抗氧化还原的作用，因此可与多种阳离子、阴离子和小分子结合；

3.BSA能防止酶吸附到管壁而损失。

牛血清白蛋白的相对分子质量为10的4次方这个级别，它不是一定的，而是多聚物的，有的地方测试 数据为70 000，这一数据是在做PCR的时候使用的数据。

牛血清白蛋白是血液中的主要成分（38g/100ml），分子量68kD，等电点4.8，含氮量16%，含糖量0.08%，仅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成，其中35个半胱氨酸组成17个二硫键，在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。

牛血清蛋白溶液可以作为测量蛋白质含量的标准曲线用。

一般买回来的牛血清蛋白是细小片状的乳白色粉末。牛的血清蛋白也以铁为基本原料。

用途

1、特纯级牛血清蛋白

用途：用作酶标、金标等诊断试剂的封闭剂，生化试验等。

性状：淡黄色干燥粉末

2、无脂肪酸牛血清蛋白

用途：用作酶标、金标等诊断试剂的封闭剂、保护剂，尤其适用于容易受脂肪酸影响的产品和试验。

性状：淡黄色干燥粉末

3、无蛋白酶牛血清蛋白

用途：用于酶标、金标等诊断试剂的封闭剂、保护剂，尤其适合血液脂类的诊断试验、脂类诊断试剂及对纯度要求高的产品。

性状：淡黄色干燥粉末

4、细胞培养级牛血清蛋白

用途：无血清培养基的蛋白添加剂，供细胞培养使用。

性状：淡黄色干燥粉末白蛋白

测定

标准曲线

一般用分光光度法测物质的含量，先要制作标准曲线，然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此，制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。

测定方法

1. 凯氏定氮法

2. 双缩法

3. Folin-酚试剂法

4. 紫外吸收法

5. 考马斯亮蓝法

标准曲线制作

试剂

1. 考马斯亮蓝试剂：

考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇，加入100ml 85% H3PO4，用蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。最终试剂中含0.01%（W/V）考马斯亮蓝G—250,4.7%（W/V）乙醇，8.5%（W/V）H3PO4。

2. 标准蛋白质溶液：

纯的牛血清血蛋白，预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，根据其纯度同0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。

器材

1. 722S型分光光度计使用及原理。

2. 移液管使用。

制作步骤

试管编号 0 1 2 3 4 5 6

100ug/ml标准蛋白（ml） 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6

0.15mol/L NaCl （ml） 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4

考马斯亮蓝试剂（ml） 5 5 5 5 5 5 5

摇匀，1h内以1号管为空白对照，在595nm处比色

3、以A595nm为纵坐标，标准蛋白含量为横坐标（六个点为10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug），在坐标轴上绘制标准曲线。

（1）、利用标准曲线查出回归方程。

（2）、用公式计算回归方程。

（3）、或用Origin作图，测出回归线性方程。即A595nm=a×X( )+6

一般相关系数应过0.999以上，至少2个9以上。

(4）、绘图时近两使点在一条直线上，在直线上的点应该在直线两侧。

含量的测定

样品即所测蛋白质含量样品（含量应处理在所测范围内），依照操作步骤1操作，测出样品的A595nm，然后利用标准曲线或回归方程求出样品蛋白质含量。

一般被测样品的A595nm值在0.1—0.05之间，所以上述样品如果A595nm值太大，可以稀释后再测A595nm值，然后再计算。

注意事项

1. 玻璃仪器要洗涤干净。

2. 取量要准确。

3. 玻璃仪器要干燥，避免温度变化。

4. 对照：用被测物质以外的物质作空白对照。