通过改变离子强度、阿霉素(ADR)的浓度和酸度,用
牛血清蛋白(BSA)研究了泡沫提取ADR的条件。采用
荧光法测定ADR,考察了操作液成分和pH值对测定的影响。实验结果表明:BSA浓度200mg/L,ADR浓度2.0u/mL,pH2.40,NaCl浓度0.5mol/L,气体流速15mL/min,进料体积8.0mL时,阿霉素的二次提取率可达70.3%。并且对其作用机理进行了讨论,ADR实现泡沫提取的主要动力是ADR的疏水部分与BSA分子间发生的疏水作用力。
利用CTAB/
正辛醇:
三氯甲烷(4:1V/V)反胶团体系对牛血清白蛋白(BSA)进行相转移中,通过对
萃取体系水相的pH值、离子强度、两液相的体积比、小分子糖(
葡萄糖、
蔗糖)及助
表面活性剂(直链醇分子)等因素的改变,探讨了BSA在阳离子表面活性剂体系的萃取机理;研究结果表明选择合适的条件提取BSA时,萃取率可达到97%,反萃率达到了85%;找到实现
牛血清蛋白分离提纯的有效方法。
分别取六只试管,其中一只加入1.0ml蒸馏水做空白,5只分别加入不同体积的浓度为100ug/ml牛血清清蛋白标准液,补充水到1.0ml。然后每只试管加入5.0ml考马斯
亮蓝G-250试剂,摇匀放置5min,在紫外-可见分光光度计595nm处测定吸光值。以A595吸光值为纵坐标,牛血清清蛋白的ug数量为横坐标绘制标准曲线。具体操作见下表。
配制浓度约100ug/ml的待测蛋白质溶液。取一只试管加入1.0ml蒸馏水做空白,一支加入0.5ml待测
蛋白质溶液,补充水到1.0ml。然后每支试管加入5.0ml考马斯
亮蓝G-250试剂,摇匀放置5min后,在紫外-可见分光光度计595nm处测定吸光值。用测得的吸光值从标准曲线上查得相当于牛血清清蛋白的ug数量,计算出待测蛋白质的含量。
牛血清清蛋白标准液结晶牛血清清蛋白或酪蛋白,预先经微量凯氏定氮法标定该
蛋白质的百分含量或者根据牛血清清蛋白的
消光系数是6.6来计算其百分含量。然后根据该蛋白的纯度配置成浓度为100ug/ml的蛋白溶液。